Е.Д. Мица, Л.Ю. Кокаева, С.Н. Еланский
оомицетов Фітофтора інфестани (Mont) de Bary викликає фітофтороз - небезпечне захворювання картоплі і томата. Одним з основних джерел первинного інокулюму P. infestans є товстостінні статеві покояться структури - ооспори.
Гібридні ооспори, що утворюються в результаті схрещування генетично різних батьківських штамів, сприяють підвищенню генотипического різноманітності в популяції, внаслідок чого прискорюється процес адаптації штамів до нових сортів і застосовуваним фунгіцидів.
Освіта ооспор P. infestans в польових умовах відзначено в багатьох країнах світу: Росії (Smirnov et al., 1999), Норвегії (Hermansen et al., 2002), Швеції (Strömberg et al., 2001), Нідерландах (Kessel et al., 2002) та інших регіонах. Ооспори здатні більш 2 років зберігатися в грунті в життєздатному стані (Bødker et al., 2006) і викликати зараження рослин після перезимівлі (Уланова та ін., 2010 року; Lehtinen et al., 2002).
Раніше було показано, що листя рослин різних ярусів куща картоплі мають відмінності в стійкості до фітофторозу; вона збільшується від нижнього листя до верхніх. Ця тенденція не залежить від віку листа, віку рослини, сорти картоплі (Vesper et al., 2003). У той же час даних про відмінності інтенсивності ооспорообразованія в листі різних ярусів куща картоплі в літературі нам знайти не вдалося. Однак якщо такі відмінності існують, то їх слід враховувати при відборі листових проб для проведення аналізу освіти ооспор і при інтерперетаціі результатів, отриманих іншими авторами. Метою цієї роботи було вивчення освіти ооспор в отчлененной листі різних ярусів рослини картоплі, поміщених в однакові умови вологих камер.
матеріали та методи
У роботі використовували 5 ізолятів P. infestans різних типів спарювання, виділених з уражених зразків, привезених з Московської, Рязанської і Ленінградської областей. З них були підібрані 3 пари штамів різних типів спарювання, що дають рясні ооспори при тесті в агаризованому вівсяної середовищі.
Для тестування використовували вирощені в теплиці (в торф'яному субстраті) безвірусні рослини картоплі наступних сортів: ранні Сандрін, Зорачка, Уладар, Озіріс, середньоранній Іллінський, середньостиглий Янка.
Для аналізу відбирали прості листя з різних рівнів рослини картоплі. Три листа були відібрані з нижнього рівня (4 нижніх складних листа), три - з верхнього (3-4 складний лист зверху), і три листа з центру куща. Прості листи зважували, фотографували на координатної папері (для розрахунку обсягу і площі), після чого поміщали нижньою стороною вгору на поверхню стерильної води, розлитої по 25 мл в чашки Петрі. Далі кожен лист заражали однією краплею змішаної суспензії зооспорангіїв ізолятів А1 і А2 типу спарювання. Для трьох листя, відібраних з кожного рівня, використовували інокулюм трьох різних пар ізолятів. Один лист заражали сумішшю інокулюму однієї пари ізолятів.
Для приготування суспензії зооспорангіїв ізоляти різних типів спарювання нарощували на агаризованому вівсяної середовищі протягом 7 діб, після чого з них змивали зооспорангії стерильною дистильованою водою. Концентрація інокулюму становила 5-7 зооспор в поле зору мікроскопа при збільшенні 80х. Кожен лист заражали однією краплею змішаної суспензії зооспорангіїв ізолятів А1 і А2 типу спарювання.
У всіх експериментах використовували по 3 картопляних листа на варіант. Після інкубації протягом 20 діб при 18 ° С кожен лист гомогенизировали в ступці з 2 мл дистильованої води. З отриманої суспензії відбирали по 3 проби, з яких готували препарати для мікроскопії.
У кожному варіанті переглядали 180 полів зору, після чого перераховували число ооспор на 1 мм2 поверхні листа. Результати обліків для кожного варіанта усереднювати.
Для розрахунку довірчого інтервалу (μ) для рівня значущості 0,05 використовували наступну формулу
де s - стандартне відхилення, n - число вимірювань, t - константа t-тесту для рівня значущості 0,05. Всі розрахунки проводили в програмі Excel (пакет Microsoft Office).
Результати та обговорення
Інокуляція листя, зібраних з різних ярусів куща картоплі і поміщених в однакові умови вологих камер, виявила відмінності в інтенсивності утворення ооспор. На всіх досліджених сортах максимальне число ооспор утворювалося при інокуляції листя, зібраних з нижнього і середнього ярусів куща. Достовірних відмінностей в освіті ооспор в нижніх і середніх листках не було виявлено.
Мінімальна кількість ооспор утворювалося в листі верхнього ярусу (рис. 1).
У листі нижнього і середнього ярусів максимальну кількість ооспор утворилося в сортах Сандрін, Іллінський, Зорачка, Уладар і Озіріс. Трохи менш інтенсивно вони утворювалися в листі сорти Янка. Максимальне число ооспор в листі верхнього ярусу спостерігали в листі сорти Уладар, далі в порядку зменшення йшли Зорачка, Озіріс, Янка, Іллінський, Сандрін, однак не всі відмінності були статистично достовірні.
Мал. 1. Освіта ооспор в листі різних ярусів куща картоплі. Нижні - листя трьох нижніх рівнів куща, верхні - 3-4 складний лист від верхівки рослини, середні - з середини куща.
Планки похибок показують довірчий інтервал для рівня значущості 0,05.
В поле утворення ооспор в нижніх і середніх листках куща сприяють і мікрокліматичні умови: більш висока вологість, знижена сонячна інсоляція і добові коливання температур (Harrison, 1992). При верхньому обприскуванні в нижню і центральну частини куща потрапляє менше пестицидів. Для зменшення освіти ооспор слід використовувати технології, що дозволяють успішно доставляти фунгіциди в нижню і середню частини куща. Хороші результати може принести використання обприскувачів з турбулентним потоком повітря і системних фунгіцидів, здатних поширюватися на необроблені частини куща.
Робота виконана за підтримки Російського Наукового фонду (проект № 14-50-00029).
Стаття опублікована в журналі «Захист картоплі» (№2, 2015)